Localization and expression of carbonic anhydrase isozyme XV in mouse tissues
SAARI, SINA (2011)
2011
Biokemia - Biochemistry
This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Hyväksymispäivämäärä
2011-03-30
Julkaisun pysyvä osoite on
http://urn.fi/urn:nbn:fi:uta-1-21254
http://urn.fi/urn:nbn:fi:uta-1-21254
Tiivistelmä
Tutkimuksen tausta ja tavoitteet: Hiilihappoanhydraasi XV (CA XV) on a-hiilihappoanhydraasi-entsyymiperheen viimeisin jäsen. Kädellisissä sitä koodaavasta geenistä on tullut pseudogeeni ja sen fysiologinen merkitys muissa lajeissa on vielä tuntematon. Tutkimuksen tavoitteena oli selvittää CA XV:n sijainti hiiren kudoksissa ja selvittää sen mahdollisia kompensoivia ominaisuuksia muiden hiilihappoanhydraasien suhteen poistogeenisissä kudoksissa.
Tutkimusmenetelmät: CA XV paikannettiin hiiren kudoksista immunohistokemian avulla ja sen sijaintia vertailtiin muiden isoentsyymien esiintymiseen. CA XV:n kompensoivaa merkitystä CA IV ja CA XIV poistogeenisissä kudoksissa tutkittiin immunohistokemian lisäksi myös geeni-ilmentymisen tasolla kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR:llä (qRT-PCR).
Tutkimustulokset: CA XV:n esiintyminen hiiren kudoksissa on hiilihappoanhydraasiisoentsyymeistä rajoittuneinta. Entsyymiä esiintyy vain munuaisissa, jossa sitä havaittiin eniten kuorikerroksen alueella mutta myös jonkin verran ytimen ulommassa osassa. Munuaistiehyessä entsyymiä esiintyy Henlen lingon paksussa nousevassa osassa sekä kokoojatiehyessä. Vertailevat värjäykset osoittivat, että tämä esiintymiskaava on ainutlaatuinen munuaisissa esiintyvien isoentsyymien keskuudessa. Immunohistokemialla oli havaittavissa pieniä muutoksia CA XV:n esiintymisessä poistogeenisissä kudoksissa, mutta transkriptionaalisella tasolla CA IV tai CA XIV puuttumisella ei ollut vaikutusta Car15:n geenin ilmentymiseen.
Johtopäätökset: Immunohistokemialla havaittu voimakas reaktio munuaisissa viittaa siihen, että CA XV:llä on oleellinen merkitys munuaisten fysiologiassa ja isoentsyymi tulisi ottaa huomioon tulevissa eläinmalleja hyödyntävissä inhibiittoritutkimuksissa.
Tutkimusmenetelmät: CA XV paikannettiin hiiren kudoksista immunohistokemian avulla ja sen sijaintia vertailtiin muiden isoentsyymien esiintymiseen. CA XV:n kompensoivaa merkitystä CA IV ja CA XIV poistogeenisissä kudoksissa tutkittiin immunohistokemian lisäksi myös geeni-ilmentymisen tasolla kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR:llä (qRT-PCR).
Tutkimustulokset: CA XV:n esiintyminen hiiren kudoksissa on hiilihappoanhydraasiisoentsyymeistä rajoittuneinta. Entsyymiä esiintyy vain munuaisissa, jossa sitä havaittiin eniten kuorikerroksen alueella mutta myös jonkin verran ytimen ulommassa osassa. Munuaistiehyessä entsyymiä esiintyy Henlen lingon paksussa nousevassa osassa sekä kokoojatiehyessä. Vertailevat värjäykset osoittivat, että tämä esiintymiskaava on ainutlaatuinen munuaisissa esiintyvien isoentsyymien keskuudessa. Immunohistokemialla oli havaittavissa pieniä muutoksia CA XV:n esiintymisessä poistogeenisissä kudoksissa, mutta transkriptionaalisella tasolla CA IV tai CA XIV puuttumisella ei ollut vaikutusta Car15:n geenin ilmentymiseen.
Johtopäätökset: Immunohistokemialla havaittu voimakas reaktio munuaisissa viittaa siihen, että CA XV:llä on oleellinen merkitys munuaisten fysiologiassa ja isoentsyymi tulisi ottaa huomioon tulevissa eläinmalleja hyödyntävissä inhibiittoritutkimuksissa.