Does expression of miR-32 affect proliferation activity of prostate cells?
Haapanen, Susanna (2018)
2018
Lääketieteen lisensiaatin tutkinto-ohjelma - Licentiate's Degree Programme in Medicine
Lääketieteen ja biotieteiden tiedekunta - Faculty of Medicine and Life Sciences
This publication is copyrighted. You may download, display and print it for Your own personal use. Commercial use is prohibited.
Hyväksymispäivämäärä
2018-01-30
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:uta-201802091202
https://urn.fi/URN:NBN:fi:uta-201802091202
Tiivistelmä
Eturauhassyöpä on miesten toiseksi yleisin syöpä kehittyneissä maissa. Eturauhassyövän ilmaantuvuus on ollut jyrkässä kasvussa 1980-luvulta lähtien osin parantuneen diagnostisten menetelmien ja merkkiaineiden, kuten PSA:n, löytämisen ansiosta. Kuitenkaan yksikään keino ei ole kyennyt erottelemaan, mikä löydetty syöpä on latentti eikä aiheuta ongelmia miehen loppuelämän aikana ja mikä on aggressiivinen nopeasti kasvava ja leviävä.
Monia merkkiaineita on löydetty ja tutkittu niiden roolia eturauhassyövän kehittymisessä, etenemisessä sekä eri hoitokeinojen vaikuttavuudessa. Yksi näistä on mikro-RNA 32 (miR-32), joka on lyhyt proteiinia koodaamaton nukleotidijuoste. miR-32 on yhdistetty muun muassa syöpäsolujen vähentyneeseen apoptoosiin.
Tässä työssä on selvitetty, onko miR-32:lla vaikutusta syöpäsolujen proliferaatioaktiivisuuteen in vivo -hiirimallissa. Työssä käytettiin genotyypiltään neljänlaisia hiirten eturauhasia: villi tyyppi, transgeeninen miR-32, transgeeninen hiMyc sekä transgeeninen miR-32 ja hiMyc yhdessä. Eturauhasleikkeille tehtiin HE-värjäyksiä, ja näistä saatujen tulosten perusteella valittiin leikkeet IHC-värjäykseen. IHC-värjäyksessä käytettiin anti-Ki-67-vasta-ainetta osoittamaan jakautumisaktiiviset solut ja vastavärinä käytettiin hematoksyliiniä.
IHC-värjäyksen tuloksista laskettiin solumäärät, ja analyysin lopputuloksena saatiin, ettei miR-32 vaikuttanut solujen jakautumisaktiivisuuteen tilastollisesti merkitsevästi. Tässä näytesarjassa kuitenkin eturauhasnäytteiden alhainen määrä (18 kpl) saattoi vaikuttaa, etteivät mahdolliset erot tulleet esille. Hiljattain julkaistut tulokset miR-32-transgeenisillä hiirillä ovat osoittaneet, että miR-32 tosiaankin lisää eturauhasen rauhasepiteelin proliferaatioaktiivisuutta osoittaen olettamani liian pienen näytemäärän vaikutuksen syyksi tilastollisesti merkitsemättömille tuloksillemme.
ABSTRACT
Does expression of miR-32 affect proliferation activity of prostate cells?
Prostate cancer is the second commonest cancer among men in the developed countries. The incidence has been in a steep rise since 1980s, partly due to better diagnostic methods, for instance the discovery of tumor indicating markers such as PSA. However, there has been no such marker to separate an indolent cancer from an aggressive form at the time of the diagnosis.
Many tumor-promoting factors have been found, one of which is micro-RNA 32 (miR-32) that has been associated with reduced apoptosis of cancer cells. Now, in this study, we explored whether miR-32 affects the proliferation activity of the prostate cancer cells, as well.
We had four different genotypes of murine prostates: wild type, transgenic miR-32, transgenic hiMyc and the combination of transgenic miR-32 and hiMyc. The prostate sample slides were HE stained and IHC stained. In IHC staining, anti-Ki-67 antibody was used to indicate proliferation activity and the results were analyzed by counting the positive and negative cells. As a result, we discovered that there was no statistically significant difference between miR-32 positive and negative sample groups. Nevertheless, this may be caused by our small sample count (18 pc) as a recent research has indicated the proliferation increasing effect of miR-32.
Monia merkkiaineita on löydetty ja tutkittu niiden roolia eturauhassyövän kehittymisessä, etenemisessä sekä eri hoitokeinojen vaikuttavuudessa. Yksi näistä on mikro-RNA 32 (miR-32), joka on lyhyt proteiinia koodaamaton nukleotidijuoste. miR-32 on yhdistetty muun muassa syöpäsolujen vähentyneeseen apoptoosiin.
Tässä työssä on selvitetty, onko miR-32:lla vaikutusta syöpäsolujen proliferaatioaktiivisuuteen in vivo -hiirimallissa. Työssä käytettiin genotyypiltään neljänlaisia hiirten eturauhasia: villi tyyppi, transgeeninen miR-32, transgeeninen hiMyc sekä transgeeninen miR-32 ja hiMyc yhdessä. Eturauhasleikkeille tehtiin HE-värjäyksiä, ja näistä saatujen tulosten perusteella valittiin leikkeet IHC-värjäykseen. IHC-värjäyksessä käytettiin anti-Ki-67-vasta-ainetta osoittamaan jakautumisaktiiviset solut ja vastavärinä käytettiin hematoksyliiniä.
IHC-värjäyksen tuloksista laskettiin solumäärät, ja analyysin lopputuloksena saatiin, ettei miR-32 vaikuttanut solujen jakautumisaktiivisuuteen tilastollisesti merkitsevästi. Tässä näytesarjassa kuitenkin eturauhasnäytteiden alhainen määrä (18 kpl) saattoi vaikuttaa, etteivät mahdolliset erot tulleet esille. Hiljattain julkaistut tulokset miR-32-transgeenisillä hiirillä ovat osoittaneet, että miR-32 tosiaankin lisää eturauhasen rauhasepiteelin proliferaatioaktiivisuutta osoittaen olettamani liian pienen näytemäärän vaikutuksen syyksi tilastollisesti merkitsemättömille tuloksillemme.
ABSTRACT
Does expression of miR-32 affect proliferation activity of prostate cells?
Prostate cancer is the second commonest cancer among men in the developed countries. The incidence has been in a steep rise since 1980s, partly due to better diagnostic methods, for instance the discovery of tumor indicating markers such as PSA. However, there has been no such marker to separate an indolent cancer from an aggressive form at the time of the diagnosis.
Many tumor-promoting factors have been found, one of which is micro-RNA 32 (miR-32) that has been associated with reduced apoptosis of cancer cells. Now, in this study, we explored whether miR-32 affects the proliferation activity of the prostate cancer cells, as well.
We had four different genotypes of murine prostates: wild type, transgenic miR-32, transgenic hiMyc and the combination of transgenic miR-32 and hiMyc. The prostate sample slides were HE stained and IHC stained. In IHC staining, anti-Ki-67 antibody was used to indicate proliferation activity and the results were analyzed by counting the positive and negative cells. As a result, we discovered that there was no statistically significant difference between miR-32 positive and negative sample groups. Nevertheless, this may be caused by our small sample count (18 pc) as a recent research has indicated the proliferation increasing effect of miR-32.